Surowica FBS (Ameryka Południowa)

Sole Hanks'a HBSS – zrównoważony roztwór soli Hanksa (Hanks’ Balanced Salt Solution)

HBSS (Hanks’ Balanced Salt Solution, czyli zrównoważony roztwór soli Hanksa) to buforowany roztwór soli stosowany rutynowo w hodowli komórek (tissue culture). Służy do różnych zastosowań laboratoryjnych, takich jak płukanie komórek przed dysocjacją, rozcieńczanie komórek, transportowanie komórek lub próbek tkanek, rozcieńczanie zawiesin komórkowych do liczenia oraz przygotowywanie odczynników. Dzięki zbuforowaniu i odpowiedniemu składowi mineralnemu HBSS pomaga utrzymać stabilne warunki fizjologiczne w otoczeniu komórek. Jego zasadniczą funkcją jest zachowanie równowagi pH i ciśnienia osmotycznego oraz zapewnienie komórkom wody i niezbędnych jonów nieorganicznych.

HBSS odgrywa rolę buforu utrzymującego optymalne pH środowiska hodowlanego. Bywa stosowany analogicznie do wodorowęglanu sodu. Potrafi on neutralizować niewielkie ilości kwasu lub zasady, działając stabilizująco na poziom pH roztworu. Utrzymanie odpowiedniego pH i równowagi jonowej jest kluczowe dla komórek hodowanych in vitro, zwłaszcza poza inkubatorem CO₂. Zastosowanie HBSS zapewnia także, że komórki pozostają w wilgotnym, izotonicznym środowisku bogatym w podstawowe jony, co zapobiega ich wysychaniu i stresowi osmotycznemu.

Rodzaje i skład roztworów Hanksa HBSS (soli Hanks'a)

Na rynku dostępna jest szeroka gama wariantów HBSS o zróżnicowanym składzie, dostosowanych do konkretnych zastosowań. Różnice dotyczą przede wszystkim obecności wapnia, magnezu oraz wskaźnika pH – czerwieni fenolowej (phenol red). Ponadto HBSS oferowany jest zarówno w postaci gotowego roztworu roboczego (1×), jak i koncentratu (10×). Poniżej przedstawiamy najpopularniejsze warianty HBSS dostępne w naszym sklepie internetowym GENOS:

• HBSS z wapniem i magnezem vs. bez wapnia i magnezu: Formulacje zawierające jony wapnia (Ca, calcium) i magnezu (Mg, magnesium) są na ogół stosowane jako media transportowe lub do przygotowywania odczynników. Z kolei roztwór soli Hanksa pozbawiony wapnia i magnezu (określany często jako HBSS without Ca/Mg) jest używany do różnych zastosowań np. do płukania komórek wrażliwych na te kationy lub w procedurach, gdzie ich obecność mogłaby zaburzać przebieg eksperymentu. W opisach produktów wariant z tymi jonami bywa oznaczany jako “with Ca, Mg”, a bez nich jako “w/o Ca, Mg”.
• HBSS z czerwoną fenolową vs. bez czerwieni fenolowej: Czerwień fenolowa to fenolowy wskaźnik pH dodawany do niektórych buforów. HBSS z dodatkiem czerwieni fenolowej ułatwia monitorowanie pH – przy odczynie kwaśnym (~pH 6,2) roztwór zmienia barwę na żółtą, a przy zasadowym (~pH 8,2) na czerwoną. Wariant pozbawiony tego barwnika (opisany jako without phenol red lub bez czerwieni fenolowej) jest wybierany, gdy obecność wskaźnika mogłaby wpływać na wyniki eksperymentu lub gdy monitoring pH nie jest wymagany.
• Roztwory 1× vs. koncentraty 10×: HBSS oferowany jako roztwór 1× jest gotowy do bezpośredniego użycia (typowo w butelkach 500 ml). Dostępne są także skoncentrowane wersje buforu – najczęściej 10-krotny koncentrat (10× conc.), który przed użyciem należy rozcieńczyć do stężenia roboczego. Zastosowanie koncentratu pozwala zaoszczędzić miejsce podczas przechowywania oraz przygotować świeży roztwór HBSS o wymaganym stężeniu jonów tuż przed zastosowaniem. W ofercie producentów można znaleźć oba formaty, co umożliwia dobranie produktu odpowiednio do potrzeb.

Każdy z powyższych wariantów HBSS zachowuje podstawowe właściwości płynu Hanksa, zapewniając właściwe warunki dla komórek. Wybór konkretnej formulacji zależy od wymagań eksperymentu – np. obecności jonów wapnia i magnezu wymaganej przez komórki lub konieczności kontroli pH za pomocą wskaźnika. Dzięki dostępności wielu opcji tego typu roztwór soli Hanksa sprawdza się w licznych protokołach laboratoryjnych, stanowiąc niezastąpiony element wyposażenia pracowni hodowli komórkowych.