DMEM/F-12 jest bazowym, szeroko stosowanym podłożem do hodowli. Dostarcza podstawowych składników odżywczych niezbędnych do wspomagania wzrostu różnych komórek ssaków, zwłaszcza gdy jest suplementowane FBS.
W przeszłości wykazano, że DMEM skutecznie pozwala na hodowlę szerokiego spektrum komórek pierwotnych, takich jak fibroblasty, neurony, HUVEC, komórki mięśni gładkich, a także ludzkich komórek, takich jak komórki glejowe, HEK-293 lub HeLa. Ponadto wykorzystywane jest do hodowli wielu różnych typów komórek zwierzęcych, takich jak Cos-7, PC-12 oraz pierwotne astrocyty szczurze.
Pochodzenie DMEM/F-12
DMEM/F-12 to mieszanina 1:1 Dulbecco's Modified Eagle Medium i Ham’s F-12 (Ham’s Nutrient Mixture F-12). Formuła ta jest suplementowana zwykle L-glutaminą oraz 15 mM HEPES.
Dulbecco's Modified Eagle Medium opiera się na Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), ale zawiera czterokrotnie wyższe stężenie aminokwasów i witamin. Ham's F-12 natomiast opiera się na podłożu Ham's F-10.
Sterylne podłoże DMEM/F-12
Podłoże do hodowli komórkowych DMEM/F-12 jest sterylnie filtrowane, co zapewnia brak mikroorganizmów i umożliwia bezpieczną hodowlę komórek w warunkach in vitro.
Czy DMEM/F-12 wymaga suplementacji?
DMEM/F-12 zawiera szereg ważnych aminokwasów, witamin, soli nieorganicznych (np. chlorek sodu) i innych składników, jak glukoza czy pirogronian sodu. Bardzo powszechną praktyką jest suplementacja podłoży klasycznych FBS-em (płodową surowicą bydlęcą - stosowaną jako uzupełnienie pożywek do hodowli komórek), zazwyczaj w stężeniu 10%. Jest to często konieczne, ponieważ podłoże nie zawiera białek, hormonów wzrostu ani lipidów, które są niezbędne do prawidłowego wzrostu komórek.
DMEM/F-12 z czerwienią fenolową
DMEM zawiera bufor utrzymujący poziom pH i zazwyczaj fenolową czerwień jako wskaźnik pH. Komórki hodowane w DMEM lub w innym podłożu zawierającym układ buforowy wodorowęglanowy muszą być utrzymywane w kontrolowanym środowisku CO₂ w stężeniu 5–10%. Zmiany barwy fenolowej czerwieni pozwalają obserwować wahania pH – od żółtego (pH ~6,2) do czerwonego (pH ~8,2).
Wysokiej jakości pożywki do hodowli komórkowych od naszych dostawców Capricorn Scientific oraz SARTORIUS są wytwarzane zgodnie z oryginalnie opublikowaną formułą. Producenci oferują szeroki zestaw modyfikacji, które zapewniają stałą wydajność i stabilność podłoża hodowlanego.
