HEPES
Co to HEPES?
HEPES to roztwór buforowy (1 M), znany również jako kwas N-2-hydroksyetylopiperazyno-N-2-etanolosulfonowy. Jest to organiczny bufor jonów obojnaczych, powszechnie stosowany w podłożach do hodowli komórkowych. HEPES stosuje się do utrzymania fizjologicznego pH w zakresie od 6,7 do 8,6, a dodanie 10 do 25 mM HEPES zapewnia dodatkową zdolność buforowania, gdy hodowla komórkowa wymaga dłuższej manipulacji poza inkubatorem z CO₂.
Nasz roztwór buforowy HEPES jest odpowiedni dla wielu systemów hodowli komórkowych, ponieważ jest nieprzepuszczalny przez błony komórkowe, ma ograniczony wpływ na reakcje biochemiczne oraz jest chemicznie i enzymatycznie stabilny. Roztwór jest przygotowany w wodzie o odpowiedniej jakości do hodowli komórkowych.
HEPES jest zalecany w przypadku bardzo wrażliwych systemów hodowli komórkowych, ponieważ zwiększa zdolność buforowania i stabilizuje pH w zakresie od 7,2 do 7,6, niezależnie od poziomu CO₂.
Najważniejsze cechy HEPES:
- Zwitterionowy bufor
- Płynna formuła o wysokiej rozpuszczalności
- Łatwy w użyciu roztwór 1M, idealny do biochemii, hodowli komórkowych i biologii molekularnej
- Wysoka rozpuszczalność
- Nieprzepuszczalność przez błony komórkowe
- Ograniczony wpływ na reakcje biochemiczne
- Bardzo niska absorpcja światła widzialnego i ultrafioletowego
- Stabilność chemiczna i enzymatyczna
- Łatwy w przygotowaniu
pKa HEPES zależy od temperatury:
- W 25ºC: pKa = 7,48
- W 37ºC: pKa = 7,31